ANG- elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

ANG- elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

真核翻譯起始因子4G抗體

β4整合素結(jié)合蛋白抗體

食道癌相關(guān)基因4蛋白抗體

紅細(xì)胞生成素抗體

胞漿環(huán)氧化物水解酶抗體

雌激素受體相關(guān)蛋白3抗體

雌激素相關(guān)受體β抗體

上皮細(xì)胞膜蛋白2抗體

甲基固醇羥化酶單加氧酶1抗體

端粒酶結(jié)合蛋白EST1A抗體

組蛋白賴氨酸N-甲基EZH1抗體

上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體

雌激素誘導(dǎo)基因121蛋白抗體

內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體

細(xì)胞骨架連接質(zhì)膜蛋白抗體

吞噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白1抗體

酪氨酸蛋白激酶受體A10抗體

腸道病毒71型/手足口病病毒抗體

轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體

酪氨酸蛋白激酶B3抗體

磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2抗體

酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4抗體

空通氣孔樣蛋白2抗體

同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體

磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體

CD39樣蛋白1抗體

真核翻譯起始因子5抗體

早期B淋巴細(xì)胞因子2抗體